Menu
  • 弹力素产品有限公司.
    P.O. 568箱
    美国密苏里州欧文斯维尔65066

  • 电话:
    传真:
    电子邮件: epc@buakaw.net

脂肪酶活性(46)

脂肪酶活性的测定(46)


设备


1. 研究质量的膨胀式pH计,配备有Ag/AgCl参比电极的玻璃体组合电极. 

2. 在恒温装置中搅拌反应容器(25毫升).g.、水浴、恒温块. 

3. A级微型滴定管,2.00毫升含有0.1毫升细分. 

试剂 
全部用不含碳酸盐,全部玻璃蒸馏,1型水制备 

1. 橄榄油-阿拉伯胶乳剂. 慢慢溶解20.6克阿拉伯胶放入150毫升水中. 加入25ml试剂级, 用低酸度橄榄油,低速搅拌10分钟,加入250毫升水. 

2. 1.5 M氯化钠 

3. 0.015氯化钙 

4. 0.054 M牛磺胆酸钠 

5. Titrant; 0.010 M氢氧化钠,标准化 

6. 0.1 M氢氧化钠 

7. 酶:溶解1mg /ml于0.5 M Tris pH 8含有5 mM去氧胆酸钠 

底物制备,15.0 ml 

按顺序交付5.0毫升橄榄油-阿拉伯胶乳剂,4毫升.0 ml 1.5 M氯化钠, 5.0 ml 0.015 M氯化钙和1.0 ml 0.054 M CaCl2和1.0 ml 0.054 M牛磺酸钠,在反应容器中充分混合. 

过程 

搅拌15毫升25ºC±0的底物平衡.脂肪酶2ºC, EPC编号.L397, EPC编号.至37°C±0.脂肪酶EPC号3ºC.LC452和EPC编号.IC398. 滴定到稳定的pH值8.5和0.1 M氢氧化钠. 添加0.002 to 0.004毫克酶. 当pH值达到8.启动计时器,送滴定液.0100 M NaOH)有滴定管ca的出口. 搅拌反应混合物表面以下5毫米. (从滴定管尖端到反应混合物使用硅胶管很方便.)保持pH值恒定在8.记录每分钟滴定液的进样量. 重复步骤15的滴定液来确定空白率.0毫升不加酶的底物. 滴定液的空白体积应小于0.2 - 4分钟,10毫升. 记录每分钟输注滴定液的空白体积. 

比活度计算
 

单位 = (Sample Vol- blank Vol) x 0.01200 x 1000

毫克                                   mg酶

友情链接: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10